2.1 實驗動物與分組
該研究共使用24只成年雄性大鼠,分為三組,每組8只:
HY組:高打哈欠品系;
LY組:低打哈欠品系;
SD組:未經選育的普通大鼠,作為對照。
雌性刺激鼠的準備:實驗中的“誘餌"為雌性SD大鼠,通過人工誘導其進入發情期。
2.2 四臂迷宮測試
研究者自行設計并搭建了一座四臂迷宮,其結構如下:中央區域通過四根直徑12cm、長25cm的管道,連接至四個末端方盒(40×30×30cm)。每個方盒與管道之間設有帶孔隔板,允許視覺、聽覺和嗅覺信號自由傳遞,但杜絕直接身體接觸。
實驗時,四個方盒中分別放置:
一只HY雄性
一只LY雄性
一只SD雄性
一個空盒(作為空白對照)
實驗當天,一只處于發情期的雌性SD大鼠被放入中央區域,允許其自由探索整個迷宮系統5分鐘。雌鼠可以自主選擇接近任何一個方盒,而雄鼠則無法主動接觸雌鼠,僅能通過隔板進行多感官交流。整個5分鐘測試期間,系統持續記錄雄性方盒一側發出的所有50 kHz USVs。
2.3 Noldus行為學工具
這里介紹諾達思為該研究提供的聲音行為學分析解決方案:在每個雄性方盒上方7.5cm處,各安裝一個頻率響應高達150 kHz的專用超聲波麥克風,采樣率設置為214 kHz,精準捕捉大鼠發出的全部超聲頻段信號。使用聲音行為分析系統(UltraVox XT)進行聲音行為分析。聲音行為分析系統(UltraVox XT)可以通過捕獲完整的聲譜,處理和分析嚙齒動物的超聲波聲和其它動物的聲音。